生血宁的生殖毒理学试验研究Ⅲ――围产期毒性试验(一)

详细内容

作者：吴瑜，王树荣，王根才，刘振斌，罗京

【摘要】 目的 观察生血宁围产期给药对成年小鼠及仔鼠的影响。方法 将试验小鼠分为生血宁大、中、小剂量组和对照组，在雌性小鼠妊娠后第15 天至分娩后21天连续给药灌胃给予生血宁，观察孕鼠围产期情况、产仔率及仔鼠的生理发育情况、神经反射功能、行为活动及生育能力。结果 仔鼠情况良好，未见明显异常。结论 生血宁对小鼠无围产期毒性作用。

【关键词】 生血宁；围产期；毒性

　　Abstract:Objective To observe the effects of administration of Shengxuening tablets in perinatal period on neonatal mice and adult mice. Methods The animals were randomized into four groups, i.e., the group administered at high dose, the group administered at the intermediate dose, the group administered at the low dose, and the control group. The test groups were intragastrically administered with Shengxuening tablets from the 15th day of pregnancy to the 21st day after labour，and conditions of pregnant mice in perinatal period and mouse birthrate, physiological development, nervous reflex, activity, and reproductive ability of the neonatal mice are observed. Results No obvious abnormality was observed in neonatal mice. Conclusion No obvious perinatal toxicity was observed in mouse administered with Shengxuening tablets.

　　Key words:Shengxuening tablets；perinatal period；toxicity

　　生血宁系以蚕砂为原料制备的中药二类新药，其主要成分为铁叶绿酸钠及叶绿素衍生物，主治缺铁性贫血（气血两虚证）〔1,2〕。临床试验表明生血宁对成人、儿童缺铁性贫血具有良好的疗效，且安全性良好〔3～5〕。为扩大适应人群范围，给妊娠期妇女用药提供安全性依据，本实验以《新药研制开发生产技术与药物临床、非临床研究管理手册》〔6〕为依据对生血宁进行了生殖毒理学研究。其中，围产期毒性试验主要侧重于研究生血宁对仔鼠安全性的影响，即在围产期给药观察对仔鼠的生理发育、神经反射功能、内脏器官、行为活动及生育能力是否有影响。

　　1 材料与方法

　　1.1 动物

SPF级昆明系健康小鼠，雌鼠160只，雄鼠80只，由山东大学实验动物中心提供，动物许可证号SCXK（鲁）20030004，体质量为（25±3）g。动物购入后首先适应性饲养1周，动物交配前按照每饲养笼（面积40 cm×25 cm）放置5只雌性动物规模饲养；动物交配时按照雌雄动物2∶1比例放置过夜。生血宁片由武汉联合药业有限责任公司提供，批号20030101。

　　1.2 方法

　　1.2.1 给药方法

　　将生血宁以蒸馏水配置成混悬液备用。雌性鼠按体质量随机均衡分为4组，即高剂量组（H）、中剂量组（M）、低剂量组（L）以及空白对照组，分别按质量浓度为2.4％生血宁，0.6％生血宁，0.15％生血宁以及蒸馏水灌胃，灌胃容量均为20 mL/kg，按体质量给药则高、中、低剂量组分别为480 mg/kg、120 mg/kg、30 mg/kg，分别相当于临床人用剂量的80倍、20倍及5倍（按公斤体质量折算）。灌胃给药时间为雌鼠交配妊娠后第15天至分娩后21天。

　　1.2.2 观察指标

试验期间每天观察雌鼠的一般情况（包括活动、行为、排泄物、背毛、眼睛分泌物等），记录饮水量、摄食量、死亡数，观察动物交配行为，计算受孕率。雌鼠受孕后观察孕鼠体质量变化情况，孕鼠分娩时统计产仔率。

仔鼠出生后24 h内称量体质量，观察外观有无畸形，记录出生存活率、哺育成活率以及性别比例，并观察体质量变化。对仔鼠的生理发育指标检查包括：耳廓分离、门齿萌出、睁眼、腹毛生长、睾丸下降、阴道开口或张开，有无褶耳或开耳孔。神经反射功能检查包括：翻正反射、痛觉反射、视觉定位反射、听觉惊愕反射、嗅觉反射、触须定位反射、断崖回避反射、瞳孔反射、吸吮能力反射、尾部悬挂反射等。仔鼠断乳后通过自主活动试验、转棒试验、游泳试验以及跳台试验进行行为测试。仔鼠出生60 d后进行动物交配，观察雌鼠交配行为并计算雌鼠受孕率。

　　1.3 统计学方法

　　计量资料以(±s)表示，采用t检验，率的比较用χ2检验。

　　2 结 果

　　2.1 雌鼠和孕鼠的一般情况

雌鼠妊娠前后一般情况良好，无异常情况出现。生血宁各组及对照组小鼠妊娠受孕率正常，组间比较差异无显著性（P＞0.05），各组受孕小鼠在用药前后体质量增长速度正常，组间比较差异无显著性（P＞0.05）,见表1。各组妊娠小鼠产仔率在88.5％～100％之间，生血宁高剂量组的产仔率稍低（88.5％），但组间比较差异无显著性（P＞0.05）。表1 孕鼠体质量变化情况和雌鼠受孕率、产仔率比较（略）