中风膏对大鼠脑出血后脑系数、脑组织含水量的影响(一)
详细内容
脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)系指原发性非外伤性脑实质内的出血,其致残率和死亡率均较高。ICH后引起机体和脑组织局部一系列病理性反应,包括脑内血肿的扩大、血肿分解产物和脑组织直接损伤释放出的血管活性物质所致的脑水肿、局部脑血流量的减少、凝血纤溶系统的改变等变化。其中脑水肿的产生是脑出血后二次损伤发生的关键性因素。脑水肿不是一种疾病而是一种临床上多变的症状,主要表现为脑组织中水分的非正常集聚,伴有脑容积的增加,导致颅内高压,直接威胁病人生命。中风膏治疗脑血管疾病在临床上已应用多年,常取得良好的疗效。本实验通过中风膏对脑系数及脑组织含水量的影响,探讨其减轻脑出血后脑水肿的机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验药品中风膏为甘肃省中医医院院内制剂,由医院制剂室完成,批号:甘卫普制(1997)-098-04。配方:岷当归、川芎、赤芍、黄芪、水蛭、羌活、甘草。工艺:将岷当归精馏后,取当归药渣与川芎、赤芍、黄芪、水蛭、羌活、甘草混合,经水提、醇沉、过滤、浓缩后与当归精馏产生的挥发油混合,灭菌制成膏剂,成品包装。质量标准:中风膏为棕黑色稠厚的半流体,味微甜后转苦,加水后易溶解。每克相当于生药9 g(依据中华人民共和国药典2000年版)。脑心通胶囊由咸阳步长制药有限公司生产,国药准字Z20025001。
1.1.2 实验动物雄性SPF级SD大鼠100只,体质量(250±50)g,由甘肃中医学院科研实验中心提供。合格证号:SCXK(甘)2005-007-0001507。
1.1. 3 实验仪器电动台式牙科钻(由甘肃省中医医院提供)、江湾Ⅰ型-C立体定位仪(由兰州大学医学院中心实验室提供)、电热恒温干燥箱(101型,北京科伟永鑫实验仪器设备厂)、电子分析天平(MC,京制0000249号,北京赛多利斯仪器系统有限公司)、微量进样器。
1.2 方法
1.2.1 分组将100只大鼠随机分为4组:空白组10只;模型组30只;中风膏治疗组(简称治疗组)30只;脑心通胶囊治疗组(简称对照组)30只。模型组、治疗组、对照组再随机分为术后1 d,3 d,5 d 3个亚组,每组各10只大鼠。
1.2.2 模型复制参照Xue[2]和Yang[3]的方法制备大鼠ICH模型。大鼠称重后给予20 %乌拉坦 (0.75 g/kg)腹腔注射麻醉,脑立体定位仪定位大鼠右侧尾状核(前囟后0.2 mm,矢状缝向右旁开3.0 mm,深度6.0 mm)[4];取血前将大鼠尾放在40 ℃温水中5 min,消毒后距末端0.5 cm处剪断,让鼠尾血自然滴下取血,用微量注射器取大鼠自体不凝血50 μL,在立体定位仪引导下向尾状核注入自体不凝血,按每分钟20 μL的速度缓慢匀速注入。注血结束留针5 min后缓慢退针,缝合切口,以上均按无菌操作进行。
1.2.3 处理空白组:普通饲养,自由饮水,不做任何处理;模型组:造模,生理盐水灌胃,剂量为40 mL/(kg・d);治疗组:每日将中风膏以温开水调成混悬液灌胃(0.9 g/kg),每毫升混悬液含中风膏0.05 g;对照组:每日将脑心通胶囊以温开水调成混悬液灌胃(0.324 g/kg),每毫升混悬液含脑心通胶囊0.02 g。均在术后麻醉清醒后开始灌胃给药,每日上午、下午各1次。
1.2.4 标本采集断头处死后开颅取脑,沿脑桥上界水平切断,取全脑称重;再取血肿周围脑组织150 mg左右,称湿重后在110 ℃电热干燥箱中烘干至恒质量称取干重。
1.2.5 计算方法脑系数=全脑重/体质量×100 %;脑组织含水量=(湿重-干重)/湿重×100 %。
1.2.6 统计分析实验结果采用SPSS12.0统计软件分析,数据以(±s)表示,经多样本均数的比较后行组间t检验。