紫外分光光度法测定长白?木根、茎、叶中总黄酮含量(一)
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作者:宁德利 阮洪生 韩承伟 黄金仁 殷奎德
【摘要】 目的对长白?木根、茎、叶中所含总黄酮的含量进行测定。方法采用紫外分光光度法于360 nm波长处测定。结果总黄酮在4.08~32.64 μg/ml范围内线性关系良好,其回归方程为:A=0.018 3C+0.012 7,R2=0.999 2;平均加样回收率为100.63% (RSD=1.93%)。结论该方法简便、准确,可用于长白?木的质量控制。
【关键词】 长白?木; 紫外分光光度法; 总黄酮
Abstract:ObjectiveTo establish a method for the determination of the total flavonoids in roots, stalks and leaves of Aralia continentalis Kitagwa.MethodsThe total flavonoids in roots, stalks and leaves of Aralia continentalis Kitagwa were determined by spectrophotometric method at 360 nm wavelength.ResultsSample size showed a good linear relationship at the range of 4.08~32.64 μg/ml,and the curve was A=0.018 3C+0.012 7, R2=0.999 2.The average recovery was 96.2% and RSD was 1.42% (n=6).ConclusionThis method is easy and aurate,and can be used for quality control of Aralia continentalis Kitagwa.
Key words:Aralia continentalis Kitagwa; Spectrophotometric method; Total flavonoids
长白?木Aralia continentalis Kitagawa属于五加科?木属,多年生宿根草本植物,又称草本刺老芽、东北土当归,分布于我国吉林、辽宁、河北、河南、四川和西藏等省区,朝鲜、前苏联也有分布〔1〕。长白?木是一种食药兼用的经济植物、营养丰富的名贵珍稀山野菜。具有祛风燥湿、解热镇痛、疏风活血、利尿解毒等功效〔2〕,主治风湿性腰腿痛、腰肌劳损等病证〔3〕。近年来,有研究机构从该植物中分离出6种具有药用价值的黄酮类化合物。由于长白?木药食兼用,而且具有很高的经济价值,对其进行深入研究非常重要。我们采用紫外-可见分光光度法对长白?木中所含总黄酮的含量进行了测定,为其质量控制及进一步的开发利用提供依据。
1 器材与试剂
1.1 样品长白?木取自于黑龙江省牡丹江林副特产研究所和大庆百合环艺中心。
1.2 试剂芦丁对照品购自南京青泽医药科技有限公司;无水三氯化铝、95%乙醇等均为分析纯。
1.3 仪器AL204型电子分析天平(梅特勒-托利多);TU-1800紫外分光光度仪(北京普析通用仪器有限责任公司);RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。
2 方法与结果
2.1 样品溶液的制备将采摘回来的长白?木进行根、茎、叶分离,105℃杀青1 h,然后在85℃烘干24 h,再进行粗粉碎,放于干燥器中备用。称取经处理过的样品适量,加入10倍量的80%乙醇,加热回流提取3次,1.5 h/次。合并提取液,过滤,滤液减压回收并浓缩至3 ml/g药材左右,浓缩液加2倍量水稀释,静置24 h。抽滤除去不溶性物质,滤液再次浓缩后加水至一定体积,即得长白?木样品溶液〔4〕。
2.2 对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品10.2 mg,置于50 ml容量瓶中,加入95%乙醇定容至刻度,超声溶解5 min,配成0.204 mg/ml标准品溶液,冷藏保存备用。
2.3 测定波长选择稀释到一定浓度的对照品和样品溶液分别加10%AlCl3溶液1 ml,以95%乙醇定容,摇匀,显色30 min。在200~600 nm波长范围内紫外扫描。发现360 nm处出现最大吸收波长,实验中选择测定波长为360 nm。