交泰丸对与下丘脑―垂体―肾上腺轴相关的细胞因子的影响探讨(一)

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【关键词】交泰丸/药理学；失眠/中药疗法；细胞因子/血液；疾病模型，动物；大鼠
交泰丸，出自明代《韩氏医通》，由黄连、肉桂两味药物以特殊的配伍比例（质量比为10∶1）组成，具有交通心肾、安神之功效，主要用于治疗心肾不交引起的惊悸、夜寐不安等症，临床疗效确切〔1-2〕。本研究观察了交泰丸对与下丘脑―垂体―肾上腺（HPA）轴相关的细胞因子的影响。
1材料与方法
1.1药物黄连和肉桂均购自广州中医药大学第一附属医院，经广州中医药大学中药学院中药鉴定教研室鉴定为正品；对氯苯丙胺酸（PCPA）为美国Sigma公司产品。
1.2动物健康清洁级雄性SD大鼠50只，体质量180～200g，从广东省医学实验动物中心购进，合格证号：2006A015。每只大鼠均在相同条件下自由饮水，摄食，保持自然光照。
1.3试剂白细胞介素?1（IL?1）试剂盒（批号：24985001）为B＆M公司产品；肿瘤坏死因子?α（TNF?α）试剂盒（批号：20061120）为晶美公司产品。
1.4主要仪器CR22G高速冷冻离心机（日本日立）；RT?2100C酶标分析仪（广州览众医疗设备有限公司）；GSX?500?BS?Ⅱ型隔水式电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂）；AUW120D型分析天平（日本岛津）；各种规格移液枪（广州实技科学仪器有限公司）。
1.5分组按照随机原则，利用随机数字表法将大鼠分为5组：正常对照组、模型组、泻心组（单用黄连15g）、补肾组（单用肉桂1.5g）、交通心肾组（黄连、肉桂质量比为15g∶1.5g），每组10只。
1.6造模〔3〕除正常对照组外，其他各组均一次性腹腔注射PCPA300mg/kg，30h后观察大鼠行为，复制大鼠完全失眠模型。
1.7给药造模成功后，正常对照组与模型组分别用生理盐水灌胃（2.5g・kg-1・d-1），其他各组以不同比例配伍的药液分别灌胃（2.5g・kg-1・d-1），每天1次，连续7d。
1.8样品采集与处理实验各组最后一次给药24h后，用100g/L水合氯醛腹腔注射（2.3mL/kg）麻醉后，腹腔静脉取血3mL，静置1h，4℃过夜，1500r/min离心30min，取上清液，大鼠血清中IL?1、TNF?α含量采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测，均严格按照试剂盒操作。
1.9统计学方法采用SPSS11.0统计软件进行统计分析。
2结果
2.1一般情况大鼠在PCPA腹腔注射30h后出现烦躁不安，白天也活动不停，不能正常睡眠，昼夜节律基本被破坏，出现完全失眠状态，说明失眠模型复制成功。各用药组连续给药7d后，模型组大鼠失眠状态无明显改善，泻心组大鼠失眠有一定好转，补肾组大鼠失眠有加重的趋势，交通心肾组大鼠失眠明显减轻。
2.2各组大鼠血清IL?1、TNF?α含量比较表1结果显示，模型组IL?1、TNF?α水平显著性降低（P＜0.05或P＜0.01）；交通心肾组IL?1、TNF?α水平显著性升高（P＜0.05）；泻心组IL?1、TNF?α水平有一定程度升高，补肾组以上2指标水平低于模型组，但与模型组比较均无显著性差异（P＞0.05）。表1各组大鼠血清IL?1、TNF?α含量比较统计方法：方差分析；①Ｐ＜０.０５，②Ｐ＜０.０1，与正常对照组比较；③Ｐ＜０.０5，与模型组比较