复方月见草油胶囊中γ?亚麻酸含量测定分析(一)
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作者:赵伟,蔡广知,王莎莎,谢小燕,贡济宇
【关键词】 月见草油;γ?亚麻酸;含量测定;GC?MS;气相色谱仪
基金项目:吉林省科技厅科技发展重大项目资助课题
月见草油(evening primrose oil)采自柳叶菜科多年生草本植物月见草(Oenothera biennis L)的种子,含有多种脂肪酸成分且多为人体必需脂肪酸,其主要有效成分为γ?亚麻酸(γ?linolenic acid,化学结构为顺?6,9,12?十八碳三烯酸),在体内可转变成花生四烯酸,为前列腺素及生物膜的构成提供前体。多年来,国内外学者对月见草油进行了大量的研究,现已证实其具有明显的抗炎、抗氧化、抗血栓、降血糖、降血脂、抗血小板聚集等药理作用,临床主要应用于糖尿病、高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病、慢性肾功能不全等疾病的治疗,现已广泛应用于医疗、保健及食品工业等领域。本文采用气相色谱法测定复方月见草胶囊中γ?亚麻酸的含量,通过气质联用的方法分析其他必需脂肪酸组成。
1 仪器与材料
电热恒温水浴、旋转蒸发器、岛津GC?14C气相色谱仪。尿素、KOH、甲醇、乙醇、盐酸、无水硫酸钠,均为分析纯。γ?亚麻酸甲酯对照品(中国药品生物制品检定所,批号:898?200101)。
2 方法与结果
2.1 尿素包合〔1〕 将月见草精制油、尿素、乙醇按1:3:5的比例混合,加热搅拌使尿素充分溶解。在0℃条件下放置12 h,抽滤,滤液回收乙醇。冷却,加盐酸酸化至pH为1-2,水洗至中性,干燥,即得。
2.2 γ?亚麻酸的含量测定〔2〕
2.2.1 甲酯化反应 为准确测定不饱和脂肪酸的含量,对尿素包合产物进行甲酯化〔3〕。取5 g包合后得油,加100 mL甲醇,10 mL浓硫酸,水浴回流2h,回收甲醇,酸水层用石油醚振摇提取3次,每次15 mL,合并石油醚提取液,用水洗至中性后用无水硫酸钠干燥,回收石油醚,即得。
2.2.2 气相色谱测定条件 岛津GC?14C气相色谱仪,DB?WAX毛细管气相色谱柱,载气压力140 kPa,尾吹气压力200 kPa,程序升温,FID检测器。
2.2.3 实验结果 以γ?亚麻酸甲酯为对照品,采用气相色谱外标法测定含量为82.66%。