创灼膏质量标准的研究(一)
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作者：张善玉， 姜艳玲， 康东周
【关键词】 创灼膏
摘要：目的建立创灼膏的质量控制方法。方法采用薄层色谱法（TLC）对制剂中冰片和防己进行定性鉴别；用高效液相色谱法(HPLC)测定盐酸小檗碱的含量。结果冰片、防己供试品与对照品色谱相应位置上皆有相同颜色的斑点，阴性对照品无干扰；盐酸小檗碱进样量在0.021~0.33 μg范围内线性关系良好，Y=4 958.4 X-15.594，r=0.999 8，平均加样回收率97.8%，RSD为2.34%。结论该方法简便、快速准确，可作为该制剂质量控制方法。
关键词：薄层色谱法； 高效液相色谱法； 盐酸小檗碱； 冰片； 防己
Study on Quality Standards of Chuangzhuo Plaster
Abstract:ObjectiveTo establish quality control method for Chuangzhuo Plaster.MethodsBomeolum Syntheticum and Radix Stephaniae Tetrandrae was identified by TLC，and the content of berberine hydrochloric was determined by HPLC.ResultsThe determination of berberine hydrochloric showed a good linear relationship at a range of 0.021～0.33，r=0.999 8，the average recoveries of berberine hydrochloric was 97.8％，RSD was 2.34％.ConclusionThe method is simple，fast and aurate，it can be used to control the quality of Chuangzhuo Plaster.
Key words:TLC； HPLC； Berberine Hydrochloric； Bomeolum Syntheticum； Radix Stephaniae Tetrandrae
创灼膏是由炉甘石(煅)、白及、冰片、甘石膏粉(由苍术、防己、黄柏等组成)等制成的纯中药制剂。具有排脓、拔毒、去腐、生皮、长肉等作用，用于烧伤、烫伤、挫裂创口、老烂脚、褥疮、手术后创口感染、冻疮溃烂、慢性湿疹及常见疮疖。创灼膏原标准(部颁标准：WS3B1127)中无鉴别和含量测定项。为提高产品的质量可控性，本研究对其主要药味冰片和防己进行了薄层鉴别，同时采用高效液相色谱法测定了黄柏中盐酸小檗碱的含量，现报道如下。
1 仪器与试药
美国惠普HPll00高效液相色谱仪，HPll00色谱工作站；硅胶G板(青岛海洋化工厂生产)；盐酸小檗碱对照品(批号110713-200208)、冰片和防己对照药材等均由中国药品生物制品检定所提供；创灼膏：按《中华人民共和国卫生部药品标准?中成药制剂》中收载的制备方法自制(批号：040625，040628，040702)乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 鉴别
2.1.1 防己的薄层鉴别〔1〕取5 g样品，加l％盐酸溶液100 ml，80～90℃温浸l h 时，放冷，滤过，滤液滴加5％氢氧化钠调节pH值至9~10，摇匀，用氯仿提取3次，80 ml/次。合并提取液，蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液；另取防己对照药材0.5g，加1％盐酸甲醇溶液20 ml，超声提取20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为对照药材溶液；再按处方比例取方中除防己以外的药材，按工艺制备缺防己的阴性样品，同样品处理方法处理得阴性对照品溶液。照薄层色谱法实验，吸取上述3种溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿丙酮甲醇浓氨试液(9∶2∶1∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷改良碘化铋钾试液显色。供试品色谱与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无相应斑点。见图1。
2.1.2 冰片的薄层鉴别〔2，3〕取本品2 g，加硅藻土1 g，将其分散均匀，置圆底烧瓶中，加水100 ml，连接挥发油提取器，于提取器中加水至水溢出，加甲苯l ml，加热提取l h，放冷，分取甲苯溶液，作为供试品溶液；另取冰片对照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液；再按处方比例取方中除冰片以外的药材，按工艺制备缺冰片的阴性样品，同样品处理方法处理得阴性对照溶液。照薄层色谱法实验，吸取上述3种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以苯氯仿醋酸乙酯(10∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷5％茴香醛硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无相应斑点见图1。
图1 薄层色谱图
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件色谱柱：依利特Sinochrom ODS-BP(4.6 mm×250 mm，5μm)；流动相：水溶液(取冰醋酸3 ml，三乙胺8 ml,加水600 ml混匀)乙腈(25∶75)；流速：1 ml/min；检测波长：345 nm；柱温：室温。
2.2.2 线性关系考察准确配制含盐酸小檗碱1.03，2.06，4.125，8.25，16.50 μg/ml的甲醇溶液，在2.2.1项的色谱条件下进行测定，进样量20 μl，以峰面积Y对照品进样量X(μg)作线性回归方程。结果盐酸小檗碱的回归方程为：Y=4 958.4X-15.594，表明盐酸小檗碱在0.021～0.33μg范围内呈良好的线性关系。
2.2.3 供试品溶液的制备取样品约5 g，精密称定，加1％盐酸溶液50 ml，80～90℃温浸2次，1 h/次，放冷，合并2次提取液，滤过，滤液加乙醚萃取 5次，50 ml/次，弃去乙醚层，水层用5%NaOH溶液调pH至10，加氯仿萃取3次，100 ml/次。合并氯仿液，水浴蒸干溶剂，残渣加甲醇使溶解，并定容至5 ml,0.45 μm微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；再按处方比例取方中除黄柏以外的药材，按工艺制备缺黄柏的阴性样品，同供试品溶液的制备方法制得阴性对照品溶液。