翻白草不同方法提取物对小鼠降血糖作用(一)

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翻白草(Potentilla discolor Bunge)为蔷薇科委陵菜属多年生草本植物，根部或干燥全草均可入药。全国各地均有分布，为我国传统中药〔1〕。近年来，民间流行用翻白草治疗糖尿病并取得一定的疗效。为了解翻白草降血糖作用机制，开发糖尿病新药或保健品，本研究对翻白草进行提取，按极性不同的3个部分，利用四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠模型进行活性筛选，以确定具有较强降血糖活性的部分。

　　1 材料与方法

　　1?1 实验动物 昆明种小鼠(雄性)100只(昆明动物所)(合格证编号：滇实验动物证第2002106号)。

　　1?2 主要试剂及仪器 四氧嘧啶(美国Sigma公司)；葡萄糖测定试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司，批号20030101)：消渴丸(广州中一药业有限公司，批号：E01895)；722型光栅分光光度计(上海分析仪器总厂)。

　　1?3 方法

　　1?3?1 样品提取并初步分离 利用乙醇浸提，乙酸乙酯萃取，D101大孔树脂柱层析，将翻白草分为I～Ⅲ部分，分别对应D101大孔树脂水洗脱部分、D101大孔树脂甲醇洗脱部分、乙酸乙酯萃取物。

　　1?3?2 实验动物糖尿病模型的建立〔2，3〕 实验动物体重(26±2)g，禁食16h，准备给予四氧嘧啶造模。四氧嘧啶溶液临用前配制，浓度为12mg／ml。给药方式为腹腔注射，剂量120mg/(kg・bw)，一周后，于第8d断食3h后，眼眶内眦采血，离心取上层血清在24h内用葡萄糖氧化酶法测定血糖。取血糖值>12mmol／L的糖尿病模型小鼠分组进行翻白草降血糖实验。

　　1?3?3 实验动物分组及处理 取血糖值>12mmol／L的糖尿病模型小鼠54只，正常小鼠10只作为对照组，共计64只，分为6组，分为糖尿病模型组(11只)、阳性对照组(10只)和3个实验组(各11只)。正常对照组、糖尿病模型组给予蒸馏水，剂量为每天450mg／(kg・bw)；阳性对照组给予降血糖药物消渴丸，剂量为3?75g(kg・bw)；3个实验组I～Ⅲ分别给予D101大孔树脂水洗脱物、D101大孔树脂甲醇洗脱物、乙酸乙酯萃取物，剂量均为每天450mg/(kg・bw)。给药方式为灌胃，每天1次，时间30d。30d后，测血糖值，条件和方法同前。30d内每周称各组小鼠空腹体重，观察体重变化。